Jumat, Januari 14, 2011

PCR

PCR (Polimerase Chain Reaction) adalah suatu proses yang digunakan untuk menganalisa secara enzimatik di luar organisme

Elemen-elemen yang diperlukan:
a. enzim polimerase > taq polimerase
b. DNA template > yang akan diperiksa
c. Primer > potongan oligonukleotida > untuk menyalin DNA target
d. Buffer > untuk mengkondisikan suasana
e. Ion > Mg2+ > kofaktor agar enzim polimerase berjalan
f. DNTP > dioksinukleoside triphosphate

PCR juga digunakan untuk memperbanyak DNA dalam waktu singkat untuk digunakan dlm penelitian

Mekanisme kerja
1. Denaturasi
Penguraian materi genetik dg pemanasan hingga suhu 95 derajat Celcius
2. Annealing
Penempelan primer pada DNA template yang telah menjadi untai tunggal. Suhu 60 derajat Celcius.
3. Extention
Pemanjangan rantai DNA baru dengan melakukan pengulangan tahap-tahap PCR sebanyak 30 siklus pada suhu 60-72 derajat Celcius

Tidak ada komentar: